商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | KLE人子宮內(nèi)膜癌細胞細胞系 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6150 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細胞 | 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
![4.jpg KLE人子宮內(nèi)膜癌細胞細胞系](https://img47.hbzhan.com/gxhpic_d7a0896008/2815d23a88cfbccaa7a93caa085cd4b117f51059caf4d84a4ce4c6d7dd7ea7c2b377d315bf9b937b.jpg)
商品詳情:
別稱 CVCL_1329
種屬 人類
年齡(性別) 女性,64歲
組織來源 子宮;子宮內(nèi)膜
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述 KLE細胞是源自一名64歲白人女性的子宮內(nèi)膜腫瘤組織,由G·R·Richardson于1984年建系。KLE細胞染色體為非整倍體,數(shù)目范圍在51-66之間。KLE細胞裸鼠植瘤后,其腫瘤標本在電鏡下顯示,細胞間見緊密相連,細胞表面具有微絨毛。KLE細胞形態(tài)特征與孕激素刺激后的子宮內(nèi)膜相似。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 DMEM/F12+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~114小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性 Yes, Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.
抗原表達情況 Blood Type O; Rh+
保藏機構 ATCC; CRL-1622 BCRJ; 0365
細胞系培養(yǎng)步驟:
細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?:
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細胞凍存?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展,為科學研究提供了大量的細胞樣本?。
?細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?:
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展,為科學研究提供了大量的細胞樣本?
細胞接收后的處理:
1)KLE人子宮內(nèi)膜癌細胞細胞系收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備MEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
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